Çalışmaya Alınan Hasta ve Kontrol Gruplarının Belirlenmesi
Çalışmaya, Ekim 2013- 2014 tarihleri arasında Fırat Üniversitesi Tıp Fakültesi (FÜTF) Acil Servisi (AS)’ne ilk 24 saatte başvuran, iskemik ve hemorajik inme tanısı almış hastalar dahil edildi. Çalışmaya başlamadan önce Fırat Üniversitesi etik kurulundan onay alındı (Toplantı Sayısı: 08, Karar No: 02, Tarih: 06/12/2013). Çalışmaya dâhil edilen olgular, çalışmanın amacı ve yapılacak işlem hakkında bilgilendirildi, çalışmaya katılmayı kabul eden olgulardan ya da hasta vekilinden yazılı olarak onam alındı.
a) Çalışmaya dâhil edilme kriterleri
- 18 yaş ve üzeri olmak
- İlk 24 saatte Acil Servis’e başvurmak
- Çalışmaya katılmayı kabul etmek
b) Çalışmadan çıkarılma kriterleri
- 18 yaş altı olgular
- Çalışmaya katılmayı istemeyen ya da sonradan çalışmadan çıkmak isteyen olgular
- Gebelik öyküsü olan veya ilk değerlendirmede gebelik testi pozitif olan bireyler,
- Eşlik eden Pulmoner embolisi olan hastalar
- Eşlik eden Akut/Böbrek Yetmezliği olanlar
- Özgeçmişinde son üç ay içinde ağır enfeksiyon, sepsis, major kardiak, hepatik yetmezlik, otoimmun, malign hastalığı bulunanlar
- Sistemik enfeksiyon romatizmal hastalıklar ve diyabeti olanlar
- Steroid tedavisi altında olanlar
Hasta grubundan 35 iskemik ve 35 hemorajik inmeli toplam 70 hasta ve benzer yaş ve cinsiyete sahip 18 sağlıklı gönüllü birey çalışma kapsamında değerlendirmeye alındı.
Örneklerin Hazırlanması ve Ölçümler
Tüm hasta ve kontrollerin serum TNF-α, IL-1β ve TGF-β2 düzeylerinin saptanması için antekubital venden jelli biyokimya tüplerine 3 ml kan örneği alındı. Alınan kan örnekleri +4°C'de 10 dakika boyunca 1600x g'de santrifüj edilip serum örnekleri pipetlerle nonsteril kapaklı ependorf tüplerinde stoklandı. Serumlar -80ºC derin dondurucuda muhafaza edildi. Ölçümlerin yapılacağı zaman, tüm serum örnekleri oda ısısına getirildikten sonra kit protokollerine göre tek seansta ve aynı ekip tarafından çalışıldı.
Serum TNF-α (Cat No: EK0525, Boster Biological Technology, Pleasanton, CA, USA), IL-1β (Cat No: EK0392, Boster Biological Technology, Pleasanton, CA, USA) ve TGF-β2 (Cat no: BMS254, Bender MedSystems, A-1030 Vienna, Austria) düzeyleri üretici firmaların talimatları doğrultusunda değerlendirildi.
TAS ve TOS ölçümleri Rel Assay marka(Rel Assay Kit Diagnostic, Türkiye) kitler kullanılarak otoanalizörde yapıldı. TAS ölçüm sonuçları mmol Trolox equivalent/L olarak 20, TOS ölçüm sonuçları litre başına mikromolar hidrojen peroksit equivalan olarak ifade edildi (μmol H202 Equiv./L) 21.
İstatistiksel Analiz
Verilerin istatistiksel analizinde IBM SPSS Statistics Versiyon 22.0 paket programı kullanıldı. Sürekli ölçümler ortalama ve standart sapma (gerekli yerlerde medyan) olarak özetlendi. Sürekli ölçümlerin normal dağılım varsayımını sağlayıp sağlamadığı Kolmogrov Smirnov testi ile test edildi. İkiden fazla grubun sürekli ölçümlerin genel karşılaştırılmasında varsayımların sağlanması durumunda Tek Yönlü Varyans Analizi, varsayımların sağlanmaması durumunda ise Kruskal Wallis testi kullanıldı. Bu karşılaştırmalarda anlamlı bulunan durumlar için grupların ikili karşılaştırılmalarında varsayımların sağlanması durumunda grup içi varyansların homojen olup olmamasına göre Tukey testleri kullanıldı. Grupların ikili karşılaştırılmalarında varsayımların sağlanmaması durumunda ise Bonferroni düzeltmesi yapılmış Mann Whitney U testi kullanıldı. Tüm testlerde istatistiksel önem düzeyi 0,05 olarak alındı.